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Turbo Chemically Competent Cell

发布时间: :2020-08-24 20:50 浏览次数: :
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详细说明:

 Turbo Chemically Competent Cell 使用说明书

产品说明:

Turbo 菌株是生长最快的大肠杆菌菌株。平板上 6.5 小时可见克隆,营养液中摇菌 4-6 小时可提取质粒,缺失核酸内切酶 (endA),提高了质粒 DNA 的产量和质量;Turbo 菌株可严格控制 lacl q的表达,可以克隆毒性基因;fhuA2 突变赋予 Turbo 菌株对噬菌体 T1 的抗性;lacZΔM15 的存在使 Turbo 可用于蓝、白斑筛选。Turbo 感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19 质粒检测转化效率>5×108 cfu/μg

产品组成:

  

 

 

 Turbo Chemically Competent Cell

10 × 100 µL

50× 100 µL

pUC19control vector10pg/μL

10μL

10μL

 

 

 

* 基因型:F' proA+B+ lacI q ΔlacZM15 / fhuA2 Δ(lac-proAB) glnV galK16 galE15 R(zgb-210::Tn10) Tet S endA1 thi-1 Δ(hsdS-mcrB)5

储存条件:

-80℃±10℃保存6个月。请勿将本品置于-20℃或液氮中保存。

使用方法:

1.       将感受态细胞从-80℃冰箱中取出,置于冰水浴中融化。

2.       将目的DNA(质粒或连接产物)加入到100μL感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育30分钟。

3.       42℃水浴热激45秒后,立刻置于冰上,静置23分钟,晃动会降低转化效率。

4.       向离心管中加入200μL无抗LBTBSOC培养基,混匀后于220rpm37℃摇床振荡复苏60分钟,使转化物表达抗性基因。

5.       根据实验要求吸取适量菌液,涂布至相应抗生素的2YTLB培养基上,室温正置10分钟,待菌液被平板充分吸收后,37℃倒置培养6.5小时以上。

注意事项:

1.       感受态细胞冰水浴中缓慢融化。插入冰中8分钟内加入目的DNA,不可在冰上放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。

2.       待转化DNA加入体积不要超过感受态细胞体积的1/10

3.       待转化DNA加入感受态细胞后,请勿用移液枪吹打,轻轻弹匀即可。

4.       为确保最高效率转化,整个操作过程应尽量轻柔,并保持冰上操作。

 

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