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“黄连解毒汤”体外抗内毒素作用的实验研究

作者:戴锡珍 高淑娟 来源:中国中医基础医学杂志 发布时间: 2010-10-07 09:12  浏览次数:
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摘 要:目的:黄连解毒汤是治疗急性感染性疾病的一个有效药物,为 证实其抑菌作用机理。方法:以黄连解毒汤提取液,采用显色基质偶氮法进行体外抗内毒素 的实验研究。结果:黄连解毒汤有较显著的减毒作用,关于电镜下观察到其作用机制,是以 破坏降解内毒素形态的直接方式而不是对内毒素活性的暂时性抑制。结论:该药物不仅通过 提高网状内皮系统的吞噬功能,加速内毒素的廓清来发挥作用,其对细菌毒素的直接中和亦 为其主要的作用方式。
关键词:黄连解毒汤;内毒素
中图分类号:R289.9;R285.5  文献标识码:B
文章编号:1006-3250(2000)05-0031-02

  本方治证乃热毒壅盛于三焦所致。火热毒盛,充斥三焦,波及上下内外。方中以大苦大 寒之黄连清泻心火为君,因心主神明,火主于心,心火宁则诸经之火自降,并且兼泻中焦之 火。臣以黄芩清上焦之火,佐以黄柏泻下焦之火,使以栀子通泻三焦,导热下行,使火热从 下而去。四药合用,苦寒直折,火邪去而热毒解,诸症可愈。正因为如此,“黄芩解毒汤” 是治疗急性感染性疾病的一个有效药物。实验研究亦证实,该药具有较好的抑菌作用和促进 网状内皮系统的吞噬功能等多方面作用。从而提示,本方剂或有拮抗内毒素生物学效应的可 能。因此对“黄连解毒汤”体外抗内毒素的作用进行了实验研究。

材料与方法

  1 中药
  由中医学院研究所提供。黄连、黄芩、黄柏、栀子,按比例以水提醇法制成100%药液,经灭 菌等处理后备用。
  2 内毒素定量检测
采用显色基质偶氮法[1],所用药物及配套试剂由上海医学化验所和上海生物制品 研究所提供。
实验方法:取中药“黄连解毒汤”提取液0.1ml,加入已知内毒素溶液0.1ml,37℃育温60 min,离心10min (300pm/min)。取上清液0.1ml,加入鲎试剂0.05,混匀。再次育温20 min,加显色基质进行显色反应,在分光光度计上以545nm比色。该方法检测内毒素的灵敏 度达50pg/ml。
  3 电镜观察
按lopes氏方法[2]制成电镜滴片,观察正常内毒素(E、colio 55B5)形态结构,并 观察样品中加入多粘菌素B(25ug/ml)和中药提取液0.2ml,加入等量的内毒素(2mg/ml),37 ℃水溶育温60min。加1滴3.8%醋酸铀,15min后,取该溶液滴于铜网上,以滤纸吸去多余液 体,于红外灯下烤干后进行电镜观察(philips. EMST400,放大倍数3000~5000倍)。

实验结果

  1 “黄连解毒汤”提取液体外抗内毒素的作用
  在中药提取液中加入10ng已知内毒素,经37℃ 60min作用后,可测得内毒素活性为34.5pg ,表明“黄连解毒汤”提取液有减毒作用,其减毒倍数为118.34倍。
  2 电镜下观察内毒素结构的变化
电镜下观察到正常内毒素超微结构呈链状式网状,这种结构不因37℃ 60min育温而发生改 变,中药提取液和内毒素作用后,这种链状盘绕结构崩解而呈板状或短片状。经中药提取液 作用后的内毒素结构变化与经多粘菌素B处理后其内毒素结构变化相同。

讨论

  中药里的清热解毒药被用来治疗各种感染性疾病由来已久,以往仅是以抑菌、杀菌[3 ]等方面进行研究。本实验提示,该类药物不仅通过提高网状内皮系统的吞噬功能,加速 内毒素的廓清来发挥作用,其对细菌毒素的直接中和亦为其主要作用方式。
“黄连解毒汤”中,黄连、黄芩、黄柏、栀子主治三焦火毒热盛证,均为典型的清热解毒药 。 上述结果可以说明,该药有较显著的解毒作用,且其对抗内毒素的作用是以破坏、降解内毒 素形态的直接方式,而不是对内毒素活性的暂时性抑制,这一点,电镜观察已得到印证。据 目前国内外报道,除多粘菌素B和乳果糖联合应用或中西医结合以凉血活血和解毒化瘀入手 进行治疗,对内毒素水平有一定影响外,消除微生物毒素尚缺肯定有效的药物。尽管多种高 效抗生素不断问世,但几乎均无抗内毒素功效。“黄连解毒汤”提取液有明显的减毒作用, 为开发利用抗内毒素中药,弥补抗生素在这方面的不足,为临床内毒素血症的治疗提供了新 的方法和途径。

作者简介:戴锡珍(1947-),女,河北人,天津中医学院副教授,主要从 事病理(侧重血液病)方面研究。
戴锡珍(天津中医学院,天津 300193)
高淑娟(天津南开医院,天津 300190)

收稿日期:1999-07-15 修回日期:2000-03-06

 

 

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中国中医基础医学杂志
CHINESE JOURNAL OF BASIC MEDICINE IN TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
2000 Vol.6 No.5 P.31-32

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