酶的提取，分离纯化
（一）细胞破碎处理
许多酶都存在于细胞内。为了提取这些胞内酶，首先需要对细胞进行破碎处理。细胞破碎的方法很多，主要包括机械破碎法、物理破碎法、化学破碎法和酶学破碎法等。机械破碎法是指利用捣碎机、研磨器或匀浆器等将细胞破碎。物理破碎法是指利用温度差、压力差或超声波等将细胞破碎。化学破碎法是指利用甲醛、丙酮等有机溶剂或表面活性剂作用于细胞膜，使细胞膜的结构遭到破坏或透性发生改变。酶学破碎法是指选用合适的酶，使细胞壁遭到破坏，进而在低渗溶液中将原生质体破碎。
（二）提取
酶的提取是指在一定条件下，用适当的溶剂处理细胞破碎后的含酶原料，使酶充分地溶解到提取液中的过程。酶的提取方法有过柱法、盐溶液提取法、碱溶液提取法和有机溶剂提取法等。为了提高酶的提取率和防止酶提取后变性失活，提取过程中必须注意保持适宜的温度和pH值，并且添加适量的保护剂。
（三）分离
提取液中含有多种酶，要想从提取液中分离纯化出某一种酶，必须根据这种酶的特性，选择合适的分离纯化方法。酶分离纯化的方法很多，可利用酶相对分子质量的大小进行分离纯化，如通过透析的方法分离酶等。
酶的生产方法
酶的生产是指经过预先设计，并且通过人工控制而获得所需要酶的过程。概括地说，酶的生产方法有提取法、发酵法和化学合成法三种。
（一）提取法
提取法是最早采用并且一直沿用至今的一种方法。提取法采用各种技术，直接从动植物或微生物的细胞或组织中将酶提取出来。提取法虽简单易行，但必须要有充足的原材料，这就使提取法的广泛应用受到了限制。但是，在动植物或微生物资源丰富的地区，提取法仍然具有应用价值。例如，在屠宰厂，可从家畜胰脏中提取胰酶；在水果加工厂，可从菠萝皮中提取菠萝蛋白酶。
（二）发酵法
发酵法是20世纪50年代以来生产酶的主要方法。发酵法主要通过微生物发酵来获得人们所需要的酶。发酵法一般包括固体发酵、液体深层发酵、固定化细胞发酵和原生质体发酵等多种方式。
（三）化学合成法
化学合成法是20世纪60年代末出现的一种生产酶的技术。1969年，美国科学家首次采用化学合成的方法获得了含有124个氨基酸的核糖核酸酶。但是，化学合成法的成本比较高，并且只能合成那些已知化学结构的酶。所以，化学合成法目前仍然停留在实验室内合成的阶段。 |
